Патологическая физиология

Патологическая физиология

Рубрика ‘Патофизиология иммуногенной реактивности организма’ Category

После предварительного взвешивания крысу привязывают к дощечке брюшком вверх.
Без анестезии >и наркоза рассекают кожу в области шеи над трахеей. Тупым путем при помощи анатомических пинцетов раздвигают мышцы и осторожно отпрепа-ровывают оба блуждающих нерва, лежащих рядом с общей сонной артерией (стараясь не повредить возвратные нервы гортани). Отпрепарованные нервы пересекают ножницами. Рану зашивают и крысу отвязывают. Затем крысе вводят подкожно или ©нутрибрюшинно 6% раствор хлористого аммония (из расчета 0,7 мл на 100 г веса).
В течение опыта наблюдают за общим состоянием (и особенностью дыхательной функции) животного; подсчитывают количество дыханий через каждые 5—10 минут. Через 40—50 минут после введения хлористого аммония крысу забивают электрическим током или декапитацией, вскрывают грудную полость и экстирпируют оба легких. После осмотра внешнего вида легких их тщательно взвешивают, вычисляют отношение веса легких к общему весу крысы и полученные результаты сравнивают с результатами опыта 1.
Студенты ведут подробный протокол опытов.

Крысе подкожно вводят скипидар из расчета 0,2 мл на 100 i веса. Спустя 20 минут этой же крысе вводят подкожно, в другую область, 6% раствор хлористого аммония (0,7 мл на 100 г веса). Тщательно наблюдают за общим состоянием животного и через каждые 10 минут подсчитывают количество дыханий в минуту. Через 40— 50 минут с момента введения хлористого аммония крысу забивают декапитацией. После торакотомии удаляют легкие, осматривают и взвешивают их; определяют ле-гочно-соматический коэффициент и сравнивают его с коэффициентом нормальных крыс и животных с токсическим отеком легких.

У крысы, фиксированной на спине, производится трахеотомия, и в трахею медленно шприцем через тонкую иглу вводят 0,5—0,6 мл 40)% раствора глюкозы. Ведут наблюдение за состоянием животного и подсчитывают дыхание через каждые 10 минут.
Через Р/2—2 часа крысу забивают декапитацией, вскрывают грудную клетку, экстирпируют легкие и затем взвешивают. Вычисляют коэффициент отношения веса легких к весу крысы и сравнивают с таким же коэффициентом нормальных крыс.

Опыт ставят на 2 крысах, желательно одного веса. У крыс подсчитывают количество дыханий в одну минуту и затем одной крысе вводят подкожно 0,1% раствор адреналина из расчета 0,2—0,3 мл на 100 г веса. Тщательно наблюдают за общим состоянием животных и через каждые 5 минут подсчитывают количество дыханий в минуту. Через 40—60 минут обеих крыс забивают декапитацией, вскрывают грудную клетку, экстирпируют легкие, взвешивают их и определяют коэффициент отношения веса легких к весу тела, сравнивают с коэффициентом нормальных крыс.

Крысе вводят подкожно скипидар из расчета 0,2 мл на 100 г веса. Спустя 20 "минут этой же крысе вводят подкожно в другую область 0,1% раствор адреналина из расчета 0,2—0,3 мл на 100 г веса. Тщательно наблюдают за общим состоянием животного и через каждые 10 минут подсчитывают число дыханий в минуту. Через 40—60 минут после введения адреналина крысу забивают декапитацией, вскрывают грудную клетку, экстирпи-руют легкие, осматривают и взвешивают их, определяют легочно-соматический коэффициент и сравнивают его с коэффициентом нормальных крыс и животных с адреналиновым отеком легких.

Крыс или кроликов наркотизируют подкожным введением нембутала из расчета 0,06—0,08 г на 1 кг веса животного. Стереотак-сические манипуляции выполняют на крысах в аппарате типа СТМ по атласу Грота, а на кроликах — в аппарате Института Богомольца по атласу Сойера с соавторами. Двустороннее электролитическое повреждение вблизи средней линии мозга наносят униполярным электродом, используя постоянный электрический ток: для крыс 2—5 мА в течение 15—30 секунд, для кроликов 4— 10 мА в течение 25—35 секунд.
У крыс электролитическое повреждение наносят так, чтобы оно проходило через плоскости А—7,8—8,0 по средней линии до зрительного перекреста (на близком расстоянии от основания мозга, задевая его центральные участки, граничащие с обеих сторон с 3-м желудочком); у кроликов — через плоскости А—3,5. Внимательно наблюдают за состоянием животных, через каждые 10— 15 минут подсчитывают число дыханий в минуту. Спустя 1 — Р/г часа после нанесения повреждения животных забивают декапитацией, вскрывают грудную клетку, экс-тирпируют легкие, осматривают и взвешивают их, определяют легочно-соматический коэффициент и сравнивают его с коэффициентом нормальных животных.

В опыт берут 2 предварительно взвешенных крыс. Одной из них (подопытной) подкожно или внутрибрюшинно вводят 12% раствор уретана (из расчета 1 мл на 100 г веса)' или 5% раствор гексенала (из расчета 0,3 мл на 100 г веса).
После этого, через 20—30 минут, обеим крысам (подопытной и контрольной) одновременно вводят подкожно или внутрибрюшинно 6% раствор хлористого аммония (из расчета 0,7 мл на 100 г веса). В течение всего опыта студенты тщательно наблюдают за состоянием и поведением животных, обращая особое внимание на расстройство дыхания, подсчитывая каждые 5—10 минуг количество дыханий в минуту.
Через 40—50 минут после введения животным хлористого аммония студенты забивают обеих крыс электрическим током или декапитацией, вскрывают у них грудную полость и экстирпируют легкие, которые после тщательного осмотра и описания их внешнего вида взвешивают. Результаты взвешивания сравнивают и вычисляют коэффициент (отношение веса легких к весу животных) .
Устанавливают, что у животных в состоянии глубокого наркоза токсический отек, легких развивается слабЬ.

Опыт ставят на 2 крысах, предварительно взвешенных (желательно иметь животных одного веса). Студенты наблюдают за исходным состоянием и поведением животных, сосредоточивая внимание на ритме и амплитуде дыхательных движений (подсчитывают количество дыханий в минуту). Затем одной из крыс (подопытной) подкожно или внутрибрюшинно вводят 6% раствор хлористого аммония из расчета 0,7 мл на 100 г веса животного. Второй (контрольной) крысе подкожно или внутрибрюшинно вводят такое же количество 0,85% раствора хлористого натрия. Студенты наблюдают за развитием токсического отека легких у подопытной крысы и, подсчитывая каждые 5—10 минут количество дыхательных движений у животного, отмечают нарушение ритма и частоты дыхания. В случае, если через 40— 50 минут животные не погибнут, обеих крыс (подопытную и контрольную) убивают электрическим током или декапитацией. Вскрывают грудную клетку, отпрепаровы-вают легкие, которые помещают на часовое стекло, где производится их внешний осмотр. Затем легкие взвешивают на весах (аптечных) и вычисляют коэффициент отношения веса легких к весу тела животного. Устанавливают наличие выраженного отека легких у подопытной крысы.

Цель занятия. Показать основные патогенетические механизмы, роль нервной системы в развитии отека легких и некоторые сано-генетические факторы, способствующие его предотвращению.
ПОДГОТОВКА К ЗАНЯТИЮ
Студенты готовятся к занятию в объеме следующих вопросов.
1. Значение нервных и гуморальных факторов в регуляции водного обмена.
2. Отеки, причины и механизмы их развития.
3. Отек легких и его патогенез.
4. Метод экспериментального воспроизведения отека легких.
Техническое оснащение занятия1
1. 12% раствор уретана или 5% раствор гексенала 30 мл
2. 6% раствор хлористого аммония 20 мл
3. Весы для взвешивания крыс 2 шт.
4. Весы аптечные 2 шт.
5. Часовые стекла б шт.
6. Шприцы на 2 мл 2 шт.
7. Скальпель 1 шт#*
8. Ножницы маленькие 2 шт.
9. Пинцеты хирургические маленькие 4 шт.
10. Пинцеты анатомические маленькие 4 шт.
11. Крючки 4 щт
12. Иглодержатели 2 шт.
13. Иглы хирургические 4 шт.
14. Столики для привязывания крыс 2 шт.
15. Лигатура 4 шт.
16. 40% раствор глюко^У 1 Ш\
17. 0,1% раствор адреналина 10 мл
18. 0,5% раствор хлористого натрия 5 мл
19. Скипидар 2 мл
20. Животные: крысы (желательно одного веса) 10 шт

Титрационная кислотность мочи (ТК) определяется титрованием мочи 0,1 н. раствором NaOH до уровня рН плазмы нормальной крови, т. е. до рН 7,40. Величина рН измеряется при помощи рН-метра. При отсутствии рН-метра моча титруется в присутствии какого-либо индикатора.
Методика определения титрационной кислотности мочи с помощью индикатора. 1. Собирают мочу за 24 часа, измеряют ее объем и затем 10 мл вносят в мерный цилиндр. Разбавляют исследуемую мочу до исчезновения ее собственной окраски. Отмечают количество воды, пошедшей на разбавление мочи.
2. В другой мерный цилиндр наливают 10 мл раствора фосфатной буферной смеси с рН 7,40. Прибавляют к смеси дистиллированную воду в количестве, равном количеству воды, израсходованной на разбавление мочи.
3. В оба цилиндра прибавляют по 2 мл индикатора фенолрот.
4. Титруют мочу, содержащуюся в первом цилиндре, 0,1 н. раствором NaOH до выравнивания ее цвета с цветом содержимого другого цилиндра.
Количество миллилитров 0,1 н. NaOH, использованных для титрования 10 мл мочи, умножается на 10. При этом титрационная кислотность выражается в миллиэквивалентах на литр. Эта цифра умножается на суточное количество мочи, выраженное в литрах. В норме титрационная кислотность мочи (в условиях смешанного питания) составляет 20—40 мэкв/сутки, что соответствует 200— 400 мл 0,1 н. NaOH, необходимого для титрования суточного количества мочи до рН 7,40.